ImmunoCAP – інструмент для точного визначення IgE-антител

Совершенство технологий – єдиний шлях до отримання достовірного клінічного результату

Алергические заболевания – глобальна медична проблема.

Точний тест in vitro на визначення IgE-антител до специфічних алергенів – це надійний інструмент для підтвердження або виключення діагнозу справжньої алергії, призначення адекватної терапії та прогнозування розвитку хвороби.

Правильний і точний результат – це необхідна база клінічної діагностики

Тільки та тест-система, яка дає справжній результат, може бути використана в клінічній практиці. Традиційно тести на виявлення IgE-антител були якісними (позитивний або негативний відповідь) або напівколичественними (за класами). Широкий спектр сенсибілізації вимагає дуже високої точності для тестів, для того щоб достовірно встановити граничні допустимі величини або межі визначеного класу.

Правильний і точний результат – необхідна умова для отримання більшої інформації

Для того щоб виявити причину виникнення алергічного захворювання, необхідно дізнатися більш детальну інформацію про розвиток процесу сенсибілізації у пацієнта. Така точна інформація може бути отримана тільки при вимірюванні рівня IgE-антител до різних алергенів в сиворотці крові.

ImmunoCAP – істинний кількісний тест на визначення IgE-антител

Для достовірного кількісного тесту на виявлення IgE-антител потрібна більш висока точність. ImmunoCAP вимірює результат в одиницях (кОд/л), що набагато більше, ніж у класах. Методологічні, підтверджені клінічними даними результати, доводять, що ImmunoCAP(Phadia) – це відмінна тест-система для точного і правильного вимірювання рівня IgE-антител, що корелює з клінічними симптомами. Тому ImmunoCAP – необхідний інструмент для діагностики алергії в клінічній практиці.

ImmunoCAP™ – це чудове технічне виконання

Високі технології, досягнуті в розробленій системі ImmunoCAP, відповідають стандартному імунологічному аналізу.

Компанія Phadia розробила власну програму якості, яка дозволяє споживачам контролювати правильність отриманих результатів. Клуб Якості – це глобальна зовнішня програма з оцінки якості тестів, яка відкриває можливість для фахівців порівнювати свої результати з аналогічними в інших лабораторіях у всьому світі. Ця практика також характеризує якість системи, продемонстровану протягом кількох років. Клуб Якості враховує всі можливі джерела варіацій у системі, включаючи умови різних лабораторій, користувачів, інструментів, реагентів та багато інших факторів.

Наслідки неякісного виконання тестів очевидні

Тест на виявлення алергенів специфічних IgE-антитіл – це складний імунний аналіз

Виявлення IgE-антитіл – це значно складніший тест порівняно з іншими аналізами і потребує особливого підходу в цій специфічній галузі технологій. Ускладнюють проведення цих методів такі фактори, як:

• Концентрація IgE-антитіл у крові дуже низька в порівнянні з іншими шуканими речовинами, навіть у високосенсибілізованих пацієнтів.
• Кожен основний алерген (наприклад, пилок дерев, харчові алергени або епітелії домашніх тварин) містять велику кількість різних алергенних компонентів (протеїнів). У зв'язку з цим аналіз повинен виявляти антитіла до всіх значущих компонентів, навіть якщо вони присутні в надзвичайно незначних кількостях в основному алергені.
• Аналіз повинен мати властивість зв'язування всіх антитіл до алергену, які конкурують з іншими антитілами інших класів імуноглобулінів, що мають таку ж специфічність, і присутні у крові у високих концентраціях.
• Більшість джерел алергенів є сумішшю компонентів у біологічному матеріалі. На склад алергену впливає джерело одержання. Залежно від географічних та сезонних відмінностей, склад протеїнів може значно відрізнятися. Тому для досягнення точності та відтворюваності тест-системи необхідний контроль за джерелом алергену, за його складом та алергенною активністю.

 a) Простий сендвіч тест із молекулами одного виду, мобілізованими на твердій фазі, для вимірювання загальної концентрації аналізованого речовини у зразку.

б) Специфічний тест на виявлення IgE-антитіл, комплексна суміш різних молекул, мобілізованих на твердій фазі, які конкурують з антитілами інших класів імуноглобулінів.

ImmunoCAP™ – унікальна тест-система, спеціально розроблена для виявлення IgE – антитіл

Тільки при ретельній розробці кожного компонента в системі можна досягти високого рівня точності імунного аналізу як комплексного вимірювання IgE-антитіл. Унікальний, повністю автоматизований аналіз – це результат багаторічного досвіду та тривалих експериментів протягом понад 30 років.

Точно спроектований інструмент

ImmunoCAP™ – інструмент, спеціально розроблений для аллергодіагностики. Інструмен-ти, реагенти, тест і процедура калібрування оптимізовані відповідно до спеціальних вимог до вимірювання IgE-антитіл.

Високий рівень автоматизації зводить до мінімуму ризик помилок оператора, тому що всі реагенти та зразки мають можливість оперативного контролю якості.

Різні моделі ImmunoCAP™ дозволяють виконувати обсяг тестів (від 1 до 1400 тестів на день) відповідно до потреб різних лабораторій.

Унікальна тверда фаза

Тверда фаза ImmunoCAP™ – унікальна розробка компанії Phadia, для проведення аллергодіагностики. Є гідрофільним високопористим полімером, який створює ідеальну поверхню для сорбції алергенів, незворотно пов'язує їх, не змінюючи нативну структуру. ImmunoCAP™ має максимально високу зв'язувальну здатність, досягнуту за рахунок використання спіненої целюлози як тверду фазу.

За рахунок цього відбувається зв'язування всіх значущих антитіл, незалежно від їхньої афінності, що впливає на незначне неспецифічне зв'язування. Це забезпечує високу чутливість тест системи та можливість виявлення дуже низьких концентрацій антитіл. Чудова стабільність алергенів ImmunoCAP™ (2 роки для всіх алергенів) – також чудова хімічна характеристика твердої фази.

Калібрувальна крива відповідно до стандартів ВООЗ

Кількісний запуск повинен бути калібрований щодо встановленого референс набору реагентів. Калібрування для ImmunoCAP™ тест-системи використовує повну багатоточкову калібрувальну криву, що включає калібратори, кожен з яких протестований відповідно до референс-реагентів ВООЗ (75/502 для IgE).

Джерело стандартизованого алергенного матеріалу

Результатом тридцятирічної практики компанії Phadia AB є стандартизація збору та характеристики джерел алергічної сировини. Ці фундаментальні розробки гарантують сталість якісного та кількісного складу компонентів у алергенах, що використовуються, та стабільності результатів від лота до лоту.

Паралельний принцип – необхідна умова достовірного кількісного тесту

Паралельність між калібраторами та розчинами зразків відтворюється у повторах у різних системах як у технології ImmunoCAP™, так і у різних наукових дослідженнях.

Рисунок 9. Паралельність – ImmunoCAP™ 100є

Широкий діапазон точного кількісного виміру

ImmunoCAP™ вимірює точні та правильні значення діапазону всіх клінічно значущих рівнів. Нижня межа вимірювання еквівалентна концентрації 0,1 kUA/l. Криві титрування паралельні калібрувальним і відображають високу відтворюваність, яка не залежить від концентрації IgE-антитіл та специфічності алергену.

Малюнок 10. Межа для визначення алергенспецифічних IgE-антитіл (NCCLS EP17-A) (15)

ImmunoCAP™ – це високоточна та повністю автоматизована тест-система, що дозволяє отримати достовірні кількісні результати

Справжня клінічна значимість

Добре відомо, що наявність алерген специфічних IgE-антитіл асоціюється з симптомом.

тикою алергічних захворювань.

Визначення присутності та рівня IgE-антитіл – необхідний та об'єктивний критерій діагностики IgE-опосередкованої алергії. Ці дані широко висвітлено у науковій літературі. Технічні характеристики демонструють, що ImmunoCAP™ це правильний шлях до точного вимірювання IgE-антитіл.

Завдяки тому, що ImmunoCAP™ відповідає всім вимогам, його використання відкриває широкі горизонти у веденні та лікуванні пацієнтів в алергологічній практиці.

Тільки тест-система, що дозволяє отримувати достовірні результати, може бути використана у клінічній практиці!
Достовірний кількісний алерготест

Використання тестів на кількісне визначення IgE-антитіл дозволяє оцінити взаємозв'язок між рівнем IgE-антитіл, сенсибілізацією та клінічними проявами алергії. Низькі значення IgE-антитіл вказують на низьку ймовірність алергічного захворювання, у той час як високий рівень IgE-антитіл має високу кореляцію з клінічними проявами захворювання. У той же час рівень IgE-антитіл у крові не стабільний. Він змінюється з розвитком захворювання, еволюцією захворювання, експозицією алергенів, а також на тлі лікування пацієнтів. Тільки точний кількісний тест IgE може бути використаний для моніторингу цих варіацій.

Малюнок 11. Співвідношення із симптомами алергії

Кількісний вимір IgE-антитіл – необхідна та надійна допомога у діагностиці, прогнозі та моніторингу алергічних захворювань

Точний, кількісний тест на IgE-антитіла дозволяє виявити IgE-антитіла на ранніх стадіях, навіть до появи клінічних симптомів.

Це дає можливість терапевтам вибрати найкращу стратегію для проведення моніторингу симптомів хвороби та запобігання розвитку ускладнень та хронічних станів.

Діагноз:

всі сенсибілюючі алергени можуть бути виявлені, а кількісний рівень IgE-антитіл дає підстави для лікаря рекомендувати їхню елімінацію з побуту пацієнта.

Прогноз:

Рання сенсибілізація може передбачити розвиток алергії. Чим вищий рівень IgE-антитіл, тим вищий ризик. IgE-антитіла до інгаляційних алергенів, що передують появі симптомів, також передбачають подальший розвиток захворювання.

Моніторинг:

Тест на специфічні IgE-антитіла допомагає спостерігати за ефектом елімінації алергенів та імунотерапії, що проводиться, стежити за динамікою стану сенсибілізації пацієнта.

ImmunoCAP™ – кількісний тест на виявлення IgE-антитіл, який допомагає дати прогноз розвитку та лікування алергічного захворювання

Довіра клініцистів

• Висока довіра клініцистів до ImmunoCAP™ у міжнародному науковому співтоваристві найкраще демонструє колосальну кількість наукових публікацій про клінічні дослідження, які використовують тест систему ImmunoCAP™
• Загалом, понад 3000 наукових публікацій присвячені основним клінічним питанням у галузі алергології та з використанням великої кількості алергенів.
• Найбільш значущі міжнародні дослідження – ETAC, MAS 90, BAMSE, ECRHS та ін – використовували тест-систему ImmunoCAP™ Phadia тісно співпрацює з провідними вченими всього світу.

Нижче наведено деякі міжнародні дослідження, в яких було використано тест-систему ImmunoCAP™

Міжнародні дослідження

ESRHS – Європейська Асоціація Служби Респіраторного Здоров'я

Європа (13 країн), США, Австралія, Нова Зеландія

Ціль: Оцінити варіації у поширенні астми, астмаподібних симптомів, фактори сприйнятливості, провокації, ризику, відмінностей у медикаментозному лікуванні астми.

Включало: 13932 пацієнтів.

ETAC - Рання терапія атопії у дітей. (5-6)

Європа (11 країн) та Канада

Мета: Вивчити потенційний ефект цетиризину для зниження ризику розвитку бронхіальної астми у дітей, які страждають на атопічний дерматит.

Включало: 817 дітей.

Національні дослідження

MAS-Мультицентрове дослідження атопії. (1,7-8)

Німеччина

Мета: Дослідити прогностичні дані різних клінічних та імунологічних параметрів, факторів експозиції алергенів та тригерних факторів розвитку атопічних захворювань у ранньому дитинстві.

Включало: 1314 дітей.

Tucson Children's Respiratory Study – Респіраторне дослідження дітей у Тусоні (9)

США

Мета: Дослідження внутрішніх взаємин між різноманітними потенційними факторами ризику ураження нижніх дихальних шляхів у перші 3 роки життя, та розвиток хронічних респіраторних станів, особливо астми у пізньому дитинстві та юнацтві. Включало: 1246 дітей.

BAMSE Study (10)

Швеція

Мета: Встановити вирішальні чинники у розвитку астми та інших алергічних захворювань у дитинстві та прогнозу вже поставленого алергічного захворювання.

Включало: 4089 дітей.

OLIN – Дослідження обструктивних захворювань легень у північній Швеції. (11)

Швеція.

Мета: Виміряти рівень сенсибілізації у школярів до кліщів домашнього пилу та таргана у навколишньому середовищі та асоціювати фактори ризику.

Включало: 2155 дітей.

Saxony - Дослідження в Анхалті (12).

Німеччина

Мета: Вивчити взаємовідносини між IgE-опосередкованою сенсибілізацією та тяжкістю ті-

чення атопічного дерматиту у дітей шкільного віку

Включало: 2201 дітей.

Дослідження алергії/непереносимості до білка коров'ячого молока (Оденс)

Данія

Мета: Дослідження непереносимості білка коров'ячого молока, сенсибілізації та атопічних захворювань з першого року життя до 15 років

Включено: 1749 дітей.

GINI – Німецьке дослідження дитячого харчування

Німеччина

Ціль: Порівняння профілактичного ефекту від застосування гідролізату казеїну із сумішшю на коров'ячому молоці.

Включено: 2252 дітей.

Джерела

1.   Nickel R et al., Sensitization to hen’s egg at the age of twelve months is predictive for allergic sensitization to common indoor and outdoor allergens at the age of three years.

J Allergy Clin Immunol, 1997; 99; 613-617.

2.   Shek LPC et al., Determination of Food- Specific IgE Levels over time can be used to Predict the

Development of Tolerence in Cow Milk and Hens’s Egg.

Allergy, Journal of Allergy & Clinical Immunolgy, 2004, in press.

3.   Burney PGJ et al. The distribution of total and specific serum IgE in the European Community

Respiratory Health Survey.

J Allergy Clin Immunol 1997;99:314-22.

4.   Jaén A et al. Specific sensitization to common allergens and pulmonary function in the European

Community Respiratory Health Survey.

Clin Exp Allergy 2002; 32:1713-19.

5.  ETAC® Study Group. Allergic factors associated with the development of asthma and the influence of cetirizine in a double-blind, randomised, placebo-controlled trial: First results of ETAC®.

Pediatr Allergy Immunol 1998;9:116-24.

6.  Warner  JO, for the ETAC  Study Group. A double-blind, randomized, placebo-controlled trial of cetirizine in preventing the onset of asthma in children with atopic dermatitis: 18 months’ treatment and 18 months’ posttreatment follow-up.

J Allergy Clin Immunol 2001;108:929-37.

7.   Bergmann RL et al. Atopic diseases in infancy. The German multicenter atopy study (MAS-90).

Pediatr Allergy Immunol 1994;5 (Suppl 1):19-25.

8.   Kulig M et al. Long-lasting sensitization to food during the first two years precedes allergic airway disease.

Pediatr Allergy Immunol 1998;9:61-67.

9.  Taussig LM et al. Tuscon Children’s Respiratory Study: 1980 to present.

J Allergy Clin Immunol 2003;111:661-75.

10. Wickman M et al. Quantification of IgE antibodies simplifies  the classification  of allergic diseases in 4-year-old children. A report from the prospective birth cohort study – BAMSE.

Pediatr Allergy Immunol 2003;14:441-47.

11.  Rönmark E at al. Four-year incidence of allergic sensitization among schoolchildren in a community where allergy to cat and dog dominates sensitization: Report from the Obstructive Lung Disease in Northern Sweden Study Group.

J Allergy Clin Immunol 2003;112:747-54.

12. Schäfer T et al. Association between severity of atopic eczema and degree of sensitization to aeroallergens in school children.

J Allergy Clin Immunol 1999;104:1280-84.

13. Høst A et al. Clinical course of cow’s milk protein allergy/intolerance and atopic diseases in childhood. Pediatr Allergy Immunol 2002;13 (Suppl 15):23-28.

14. von Berg A et al. The effect  of hydrolyzed cow’s milk formula for allergy prevention in the first year of life: The German Infant Nutritional Intervention Study, a randomized double-blind trial.

J Allergy Clin Immunol 2003;111:533-40.

15. NCCLS. Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantification; Approved

Guideline. NCCLS document EP17-A (ISBN 1-56238-551-8) October 2004.

Internal references: Doc. 327882.

16. Dolen W.K., Allergy Review Series X: Progress in diagnosis of allergy in vitro. Ige antibody in the serum – detection and diagnostic significance.

Allergy 2003; 58: 717-723

17. Liappis N., Starke A., Lantto O., Rydén B., Investigation of Pharmacia UniCAP® 100 for in vitro allergy diagnosis.

Clin Lab 1999; 45:229-235

18. Paganelli R, Ansoteugi I.J., Sastre J., Lange C.-E., Roovers M.H.W.M., de Groot H., Lindholm N.B., Ewan P.W.,  Clinical evaluation of a new in vitro test system, UniCAP®, in six European allergy clinics.

Allergy 1998; 53: 763-8

19. Sampson H.A., Ho D.G., Relationship between food-specific IgE concentrations and the risk of positive food challenges in children and adolescents.

J Allergy Clin Immunol, 1997; 100: 444-51

20. Söderström L, Kober A, Ahlstedt S, de Groot H., Lange C.-E, Paganelli P. , Roovers M.H.W.M., Sastre J., A further evaluation of the clinical use of Specific IgE antibody testing in allergic diseases.

Allergy 2003: 58: 921-928

21. Williams PB, Barnes J.H, Szeinbach S.L, Sullivan T.J., Analytic precision and accuracy of commercial immunoassays for specific IgE: Establishing a standard.

J Allergy Clin Immunol 2000; 105:1221-30

22. Yman L., In Wild D, editor. The Immunoassay Handbook. 2:nd ed. London: Nature Publishing

Group; 2001. p. 664-680

23. Yunginger JW, Ahlstedt S, Eggleston PA, Homburger HA, Nelson HS, Ownby DR, Platts-Mills TAE, Sampson HA, Sicherer SH, Weinstein AM, Williams PB, Wood  RA, Zeiger RS., Quantitative IgE antibody assays in allergic diseases.

J Allergy Clin Immunol 2000; 105:1077-84