ImmunoCAP – инструмент для точного измерения IgE-антител
Совершенство технологий – единственный путь к получению достоверного клинического результата
Аллергические заболевания – глобальная медицинская проблема.
Точный тест in vitro на выявление IgE-антител к специфическим аллергенам – это надежный инструмент для подтверждения или исключения диагноза истинной аллергии, назначения адек- ватной терапии и прогнозирования развития болезни.
Правильный и точный результат – это необходимая база клинической диагностики
Только та тест-система, которая дает истинный результат, может быть использована в клини- ческой практике. Традиционно тесты на выявление IgE-антител были качественными (позитив- ный или негативный ответ) или полуколичественными (по классам). Широкий спектр сенсиби- лизации требует очень высокой точности для тестов, для того чтобы достоверно установить пределы допустимых значений или границы определенного класса.
Правильный и точный результат – необходимое условие для получения большей информации
Для того чтобы понять причину возникновения аллергического заболевания, необходимо по-лучить более подробную информацию о развитии процесса сенсибилизации у пациента. Та- кая точная информация может быть получена только при количественном измерении уровня IgE-антител к различным аллергенам в сыворотке крови.
ImmunoCAP – истинный количественный тест на определение IgE-антител
Для достоверного количественного теста на выявление IgE-антител требуется более высокая точность. ImmunoCAP измеряет результат в единицах (кU/l), что намного вернее, чем в клас- сах. Методологические, подтвержденные клиническими данными результаты, доказывают, что ImmunoCAP(Phadia) – это отличная тест-система для точного и правильного измерения уров- ня IgE-антител, коррелирующая с клиническими симптомами. Поэтому ImmunoCAP – необходи- мый инструмент для диагностики аллергии в клинической практике.
ImmunoCAP™ – это великолепное техническое исполнение
Высокие технологии, достигнутые в разработанной системе ImmunoCAP, соответствуют стан-дартному иммунологическому анализу.
Рисунок 1. Точность профиля для Immuno CAP 250/1000
Рисунок 2. Клуб Качества Phadia. Суммарный коэффициент вариации для специфических IgE-антител за период с июля 2000 по июнь 2004 гг. Смесь из 3-х аллергенов, 450 лабораторий и различные реагенты, включающие приблизительно 20 лотов на аллерген для ImmunoCAP
Компания Phadia разработала собственную программу качества, позволяющую потребителям контролировать правильность полученных результатов. Клуб Качества – это глобальная вне- шняя программа по оценке качества тестов, открывающая возможность для специалистов срав- нивать свои результаты с аналогичными в других лабораториях во всем мире. Эта практика так- же характеризует качество системы, продемонстрированное в течение нескольких лет. Клуб Качества учитывает все возможные источники вариаций в системе, включая условия различных лабораторий, пользователей, инструментов, реагентов и множество других факторов.
Последствия некачественного выполнения тестов очевидны
Рисунок 3. Тест с коэффициентом вариации CV=10% выдает количественные результа- ты соответствующие реальному клиническому заключению.
Рисунок 4. Тест с коэффициентом вариации CV=25% не выдает количественные резуль- таты соответствующие реальному клиническому заключению.
Тест с высоким коэффициентом вариации требует больше повторов | повышение себестоимости | |
Тест с высоким коэффициентом вариации с небольшим количеством повторов вызывает сомнение, и становится причиной необходимости повторения теста | анализ отклонен | |
Тест с высоким коэффициентом вариации с небольшим количеством повторов дает недостоверный результат | ограничение клинической пригодности |
Правильный и точный результат | клинически достоверный вывод | |
Тесты на системе ImmunoCAP клинически достоверны и экономически выгодны! |
Тест на выявление аллерген специфических IgE-антител – это сложный иммунный анализ
Выявление IgE-антител – это значительно более сложный тест, по сравнению с другими анали- зами и требует особого подхода в этой специфичной области технологий. Осложняют проведе- ние этих методов такие факторы, как:
- Концентрация IgE-антител в крови очень низкая по сравнению с другими искомыми вещест-вами, даже у высокосенсибилизированных пациентов.
- Каждый основной аллерген (например, пыльца деревьев, пищевые аллергены или эпите- лий домашних животных) содержат большое количество различных аллергенных компо- нентов (протеинов). В этой связи, анализ должен выявлять антитела ко всем значимым компонентам, даже если они присутствуют в чрезвычайно ничтожных количествах в ос- новном аллергене.
- Анализ должен иметь свойство связывания всех антител к аллергену, конкурирующими с другими антителами других классов иммуноглобулинов, обладающих такой же специфич- ностью, и присутствующих в крови в высоких концентрациях.
- Большинство источников аллергенов представляют собой смесь компонентов в биологичес- ком материале. На состав аллергена влияет источник получения. В зависимости от геогра- фических и сезонных различий, состав протеинов может значительно различаться. Поэтому для достижения точности и воспроизводимости тест- системы, необходим контроль за ис- точником аллергена, за его составом и аллергенной активностью.
Рисунок 5.
a) Простой сэндвич тест с молекулами одного вида, мобилизованными на твердой фазе, для измерения общей концентрации анализируемого вещест- ва в образце.
б) Специфический тест на выявление IgE-антител, комплексная смесь раз- личных молекул, мобилизованных на твердой фазе, конкурирующих с антите- лами других классов иммуноглобулинов.
ImmunoCAP™ – уникальная тест-система, специально разработанная для выявления IgE – антител
Только при тщательной разработке каждого компонента в системе, можно достигнуть высоко- го уровня точности иммунного анализа как комплексного измерения IgE-антител. Уникальный, полностью автоматизированный анализ – это результат многолетнего опыта и продолжитель- ных экспериментов в течение более 30 лет.
Точно спроектированный инструмент
ImmunoCAP™ – инструмент, специально разработанный для аллергодиагностики. Инструмен-ты, реагенты, тест и процедура калибровки оптимизированы в соответствии со специальными требованиями к измерению IgE-антител.
Высокий уровень автоматизации сводит к минимуму риск ошибок оператора, так как все реаген-ты и образцы имеют возможность оперативного контроля качества.
Различные модели ImmunoCAP™ позволяют выполнять объем тестов (от 1 до 1400 тестов в день), в соответствии с потребностью различных лабораторий.
ImmunoCAP™ 100є
ImmunoCAP™ 250є
ImmunoCAP™ 1000є
Уникальная твердая фаза
Твердая фаза ImmunoCAP™ – уникальная разработка компании Phadia, для проведения аллер- годиагностики. Представляет собой гидрофильный высокопористый полимер, который создает идеальную поверхность для сорбции аллергенов, необратимо связывает их, не меняя нативную структуру. ImmunoCAP™ имеет максимально высокую связывающую способность, достигнутую за счет использования вспененной целлюлозы в качестве твердой фазы.
За счет этого происходит связывание всех значимых антител, независимо от их аффинности, влияющей на незначительное неспецифичное связывание. Это обеспечивает высокую чувстви- тельность тест системы и возможность выявления очень низких концентраций антител. Превосходная стабильность аллергенов ImmunoCAP™ (2 года для всех аллергенов) – является также отличной химической характеристикой твердой фазы.
Рисунок 6. Связывающая способность: аналог лунки планшета, активированный бумажный диск, активированная вспененная целлюлоза.
Калибровочная кривая в соответствии со стандартами ВОЗ
Количественный запуск должен быть откалиброван относительно установленного референс на- бора реагентов. Калибровка для ImmunoCAP™ тест-системы использует полную многоточеч- ную калибровочную кривую, включающую калибраторы, каждый из которых протестирован в со- ответствии с референс-реагентами ВОЗ (75/502 для IgE).
Рисунок 8. Калибровочная кривая в соответствии со стандартами ВОЗ
Источник стандартизированного аллергенного материала
Результатом тридцатилетней практики компании Phadia AB является стандартизация сбора и характеристики источников аллергенного сырья. Эти фундаментальные разработки гарантиру- ют постоянство качественного и количественного состава компонентов в используемых аллер- генах и стабильности результатов от лота к лоту.
Рисунок 7. Средние значения 29 последовательных лотов ImmunoCAP™ d1, полученных с декабря 20 01 до сентября 2003, выполненных в 451 лабораториях 21 стран (об- щий коэффициент вариации CV=9,4%).
Параллельный принцип – необходимое условие для достоверного количественного теста
Параллельность между калибраторами и растворами образцов воспроизводится в повторах в различных системах как в технологии ImmunoCAP™, так и в различных научных исследованиях.
Рисунок 9. Параллельность – ImmunoCAP™ 100є
Широкий диапазон точного количественного измерения
ImmunoCAP™ измеряет точные и правильные значения диапазона всех клинически значимых уровней. Нижняя граница измерения эквивалентна концентрации 0,1 kUА/l. Кривые титрования параллельны калибровочным и отражают высокую воспроизводимость, независящую от кон- центрации IgE-антител и специфичности аллергена.
Рисунок 10. Предел для определения аллергенспецифических IgE-антител (NCCLS EP17-A) (15)
ImmunoCAP™ – это высокоточная и полностью автоматизированная тест-система, позволяющая получить достоверные количественные результаты
Истинная клиническая значимость
Хорошо известно, что наличие аллерген специфических IgE-антител ассоциируется с симптома-
тикой аллергических заболеваний.
Определение присутствия и уровеня IgE-антител – необходимый и объективный критерий диа- гностики IgE-опосредованной аллергии. Эти данные широко освещены в научной литературе. Технические характеристики демонстрируют, что ImmunoCAP™ это верный путь к точному из- мерению IgE-антител.
Благодаря тому, что ImmunoCAP™ отвечает всем предъявляемым требованиям, его исполь- зование открывает широкие горизонты в ведении и лечении пациентов в аллергологической практике.
Только тест-система, позволяющая получать достоверные результаты, может быть использована в клинической практике!
Достоверный количественный аллерготест
Использование тестов на количественное определение IgE-антител позволяет оценить взаимо- связь между уровнем IgE-антител, сенсибилизацией и клиническими проявлениями аллергии. Низкие значения IgE-антител указывают на низкую вероятность аллергического заболевания, в то время как, высокий уровень IgE-антител имеет высокую корреляцию с клиническими прояв- лениями заболевания. В то же время, уровень IgE-антител в крови не стабилен. Он меняется с развитием заболевания, эволюцией заболевания, с экспозицией аллергенов, а также на фоне лечения пациентов. Только точный количественный IgE-тест может быть использован для мо- ниторинга этих вариаций.
Рисунок 11. Соотношение с симптомами аллергии
Количественное измерение IgE-антител – необходимая и надежная помощь в диагностике, прогнозе и мониторинге аллергических заболеваний
Точный, количественный тест на IgE-антитела позволяет выявить IgE-антитела на ранних стадиях, даже до появления клинических симптомов.
Это дает возможность терапевтам выбрать наилучшую стратегию для проведения мониторинга симптомов болезни и предотвращения развития осложнений и хронических состояний.
Диагноз:
все сенсибилирующие аллергены могут быть выявлены, а количественный уровень IgE-антител дает основания для врача рекомендовать их элиминацию из быта пациента.
Прогноз:
Ранняя сенсибилизация может предсказать развитие будущей аллергии. Чем выше уровень IgE-антител, тем выше риск. IgE-антитела к ингаляционным аллергенам, предшествующие появлению симптомов, также предвещают дальнейшее развитие заболевания.
Мониторинг:
Тест на специфические IgE-антитела помогает наблюдать за эффектом элиминации аллергенов и проводимой иммунотерапии, следить за динамикой состояния сенсибилизации пациента.
ImmunoCAP™ – количественный тест на выявление IgE-антител, который помогает дать прогноз развития и лечения аллергического заболевания
Доверие клиницистов
- Высокое доверие клиницистов к ImmunoCAP™ в международном научном сообществе лучше всего демонстрирует колоссальное количество научных публикаций о клинических исследова- ниях, использующих тест систему ImmunoCAP™
- В целом, более 3000 научных публикаций посвящены основным клиническим вопросам в области аллергологии и с использованием большого количества аллергенов.
- Наиболее значимые международные исследования – ETAC, MAS 90, BAMSE,ECRHS, и др – использовали тест-систему ImmunoCAP™ Phadia тесно сотрудничает с ведущими учеными всего мира.
Ниже приведены некоторые международные исследования, в которых была использована тест-система ImmunoCAP™
Международные исследования
ESRHS – Европейская Ассоциация Службы Респираторного Здоровья
Европа (13 стран), США, Австралия, Новая Зеландия
Цель: Оценить вариации в распространении астмы, астмаподобных симптомов, факторы восприимчивости, провокации, риска, различий в медикаментозном лечении астмы.
Включало: 13 932 пациентов.
ETAC – Ранняя терапия атопии у детей. (5-6)
Европа (11стран) и Канада
Цель: Изучить потенциальный эффект цетиризина для снижения риска развития бронхиальной астмы у детей, страдающих атопическим дерматитом.
Включало: 817 детей.
Национальные исследования
MAS- Мультицентровое исследование атопии.(1,7-8)
Германия
Цель: Исследовать прогностические данные различных клинических и иммунологических пара- метров, факторов экспозиции аллергенов и триггерных факторов развития атопических заболе- ваний в раннем детстве.
Включало: 1 314 детей.
Tucson Children’s Respiratory Study – Респираторное исследование детей в Тусоне (9)
США
Цель: Исследование внутренних взаимоотношений между многообразными потенциальными факторами риска поражения нижних дыхательных путей в первые 3 года жизни, и развитие хро- нических респираторных состояний, особенно астмы в позднем детстве и юношестве. Включало: 1 246 детей.
BAMSE Study (10)
Швеция
Цель: Установить решающие факторы в развитии астмы и других аллергических заболеваний в детстве, и прогноза уже поставленного аллергического заболевания.
Включало: 4 089 детей.
OLIN – Исследование обструктивных заболеваний легких в северной Швеции. (11)
Швеция.
Цель: Измерить уровень сенсибилизации у школьников к клещам домашней пыли и таракану в окружающей среде и ассоциировать факторы риска.
Включало: 2 155 детей.
Saxony – Исследование в Анхалте (12).
Германия
Цель: Изучить взаимоотношение между IgE-опосредованной сенсибилизацией и тяжестью те-
чения атопического дерматита у детей школьного возраста.
Включало: 2 201 детей.
Исследование аллергии/непереносимости к белку коровьего молока (г.Оденс)
Дания
Цель: Исследование непереносимости белка коровьего молока, сенсибилизации и атопических заболеваний с первого года жизни до 15 лет
Включено: 1 749 детей.
GINI – Немецкое исследование детского питания
Германия
Цель: Сравнение профилактического эффекта от применения гидролизата казеина со смесью на коровьем молоке.
Включено: 2 252 детей.
Источники
1. Nickel R et al., Sensitization to hen’s egg at the age of twelve months is predictive for allergic sensitization to common indoor and outdoor allergens at the age of three years.
J Allergy Clin Immunol, 1997; 99; 613-617.
2. Shek LPC et al., Determination of Food- Specific IgE Levels over time can be used to Predict the
Development of Tolerence in Cow Milk and Hens’s Egg.
Allergy, Journal of Allergy & Clinical Immunolgy, 2004, in press.
3. Burney PGJ et al. The distribution of total and specific serum IgE in the European Community
Respiratory Health Survey.
J Allergy Clin Immunol 1997;99:314-22.
4. Jaén A et al. Specific sensitization to common allergens and pulmonary function in the European
Community Respiratory Health Survey.
Clin Exp Allergy 2002; 32:1713-19.
5. ETAC® Study Group. Allergic factors associated with the development of asthma and the influence of cetirizine in a double-blind, randomised, placebo-controlled trial: First results of ETAC®.
Pediatr Allergy Immunol 1998;9:116-24.
6. Warner JO, for the ETAC Study Group. A double-blind, randomized, placebo-controlled trial of cetirizine in preventing the onset of asthma in children with atopic dermatitis: 18 months’ treatment and 18 months’ posttreatment follow-up.
J Allergy Clin Immunol 2001;108:929-37.
7. Bergmann RL et al. Atopic diseases in infancy. The German multicenter atopy study (MAS-90).
Pediatr Allergy Immunol 1994;5 (Suppl 1):19-25.
8. Kulig M et al. Long-lasting sensitization to food during the first two years precedes allergic airway disease.
Pediatr Allergy Immunol 1998;9:61-67.
9. Taussig LM et al. Tuscon Children’s Respiratory Study: 1980 to present.
J Allergy Clin Immunol 2003;111:661-75.
10. Wickman M et al. Quantification of IgE antibodies simplifies the classification of allergic diseases in 4-year-old children. A report from the prospective birth cohort study – BAMSE.
Pediatr Allergy Immunol 2003;14:441-47.
11. Rönmark E at al. Four-year incidence of allergic sensitization among schoolchildren in a community where allergy to cat and dog dominates sensitization: Report from the Obstructive Lung Disease in Northern Sweden Study Group.
J Allergy Clin Immunol 2003;112:747-54.
12. Schäfer T et al. Association between severity of atopic eczema and degree of sensitization to aeroallergens in school children.
J Allergy Clin Immunol 1999;104:1280-84.
13. Høst A et al. Clinical course of cow’s milk protein allergy/intolerance and atopic diseases in childhood. Pediatr Allergy Immunol 2002;13 (Suppl 15):23-28.
14. von Berg A et al. The effect of hydrolyzed cow’s milk formula for allergy prevention in the first year of life: The German Infant Nutritional Intervention Study, a randomized double-blind trial.
J Allergy Clin Immunol 2003;111:533-40.
15. NCCLS. Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantification; Approved
Guideline. NCCLS document EP17-A (ISBN 1-56238-551-8) October 2004.
Internal references: Doc. 327882.
16. Dolen W.K., Allergy Review Series X: Progress in diagnosis of allergy in vitro. Ige antibody in the serum – detection and diagnostic significance.
Allergy 2003; 58: 717-723
17. Liappis N., Starke A., Lantto O., Rydén B., Investigation of Pharmacia UniCAP® 100 for in vitro allergy diagnosis.
Clin Lab 1999; 45:229-235
18. Paganelli R, Ansoteugi I.J., Sastre J., Lange C.-E., Roovers M.H.W.M., de Groot H., Lindholm N.B., Ewan P.W., Clinical evaluation of a new in vitro test system, UniCAP®, in six European allergy clinics.
Allergy 1998; 53: 763-8
19. Sampson H.A., Ho D.G., Relationship between food-specific IgE concentrations and the risk of positive food challenges in children and adolescents.
J Allergy Clin Immunol, 1997; 100: 444-51
20. Söderström L, Kober A, Ahlstedt S, de Groot H., Lange C.-E, Paganelli P. , Roovers M.H.W.M., Sastre J., A further evaluation of the clinical use of Specific IgE antibody testing in allergic diseases.
Allergy 2003: 58: 921-928
21. Williams PB, Barnes J.H, Szeinbach S.L, Sullivan T.J., Analytic precision and accuracy of commercial immunoassays for specific IgE: Establishing a standard.
J Allergy Clin Immunol 2000; 105:1221-30
22. Yman L., In Wild D, editor. The Immunoassay Handbook. 2:nd ed. London: Nature Publishing
Group; 2001. p. 664-680
23. Yunginger JW, Ahlstedt S, Eggleston PA, Homburger HA, Nelson HS, Ownby DR, Platts-Mills TAE, Sampson HA, Sicherer SH, Weinstein AM, Williams PB, Wood RA, Zeiger RS., Quantitative IgE antibody assays in allergic diseases.
J Allergy Clin Immunol 2000; 105:1077-84